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日期:2020-08-17浏览:957次
Invitrogen品牌代理山羊抗豚鼠IgG(H + L)高度交叉吸附二级抗体,Alexa Fluor 488的产品说明。
货号:A-11073
产品特定信息
为了大程度地减少交叉反应,已对这些山羊抗豚鼠IgG(H + L)完整二级抗体进行了亲和纯化,并针对牛,鸡,山羊,仓鼠,人,小鼠,兔,大鼠和绵羊的血清进行了交叉吸附进行共轭。交叉吸附或预吸附是纯化步骤,可提高抗体的特异性,从而提高灵敏度并减少背景染色。使第二抗体溶液通过含有固定血清的柱基质来自潜在交叉反应物种的蛋白质。只有非特异性结合的二抗被捕获在色谱柱中,高特异性的二抗流过。这个额外步骤的好处在多重/多色实验(例如流式细胞术)中很明显,在其中可能与其他一抗发生交叉反应,或者在组织/细胞荧光染色实验中可能存在内源性免疫球蛋白。
Alexa Fluor染料是当今受信任的荧光染料之一。Invitrogen™Alexa Fluor 488染料是一种明亮的绿色荧光染料,具有激发光,非常适合488 nm激光线。为了在成像和流式细胞仪中稳定产生信号,Alexa Fluor 488染料在很宽的摩尔范围内对pH值不敏感。具有高荧光量子产率和高光稳定性的探针可以以高灵敏度检测低丰度生物结构。Alexa Fluor 488染料分子可以高摩尔比连接到蛋白质上,而无需明显的自猝灭,可实现更亮的结合物和更灵敏的检测。每个缀合物的标记程度通常是每个IgG分子2-8个荧光团分子;每个产品批次的分析证书上均会标明确切的标签等级。
使用结合物溶液:使用前,将蛋白结合物溶液在微量离心机中短暂离心;仅将上清液添加到实验中。此步骤将有助于消除在存储过程中可能形成的任何蛋白质聚集体,从而减少非特异性背景染色。由于染色方案随应用而变化,因此应凭经验确定抗体的适当稀释度。对于荧光团标记的抗体,对于大多数免疫组织化学和流式细胞术应用而言,终浓度为1-10 µg / mL应该是令人满意的。
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