Bio/Data Corporation代理商之产品105997 UPTT™ REAGENT

biodatacorp 105997凝血活酶时间测定试剂

UPTT™ 试剂是一种用于测试设备和材料的血液相容性的标准化试剂。

• 缓冲兔脑脑磷脂的冻干制备

• 标准化磷脂浓度

• 执行（未激活）部分促凝血酶原激酶时间 (PTT) 测试

• 检测装置或提取物对内在凝血途径的激活作用

剂

注：验证使用的抗凝剂类型和浓度。颜色顶部不随柠檬酸盐浓度的不同而变化。

注射器技术（替代程序）13

1. 使用获批用于实验室标本的带翼针采集装置

2. 用塑料注射器抽取 9.0 mL 血液。避免过度抽吸。

3. 从收集装置中取出针头

4. 立即轻轻将血液分配至聚丙烯管中，该管含有 1.0 mL 0.11M 柠檬酸钠（血液与抗凝剂比例为 9:1）

5. 盖上管盖，轻轻颠倒 4-5 次，混匀。

6. 试验前，将样品在室温下多保存两小时。

样品制备

血小板功能离心机

1. 将样本放入 PDQ

2. 选择 PFP 设置

3. 按下开始

台式离心机：贫血小板血浆制备 12,14,15,16

1. 将标本放入离心机

2. 以 2500 xg 离心标本 15 min。

收获样品

1. 使用塑料移液管

2. 小心移除贫血小板血浆；不得干扰血沉棕黄层。

3. 将样本转移至塑料管和盖上

4. 检测前，样品可在 (15-28 °C) 下储存多 2 小时

• 应根据实验室政策使用丢弃管。

• 根据标本的红细胞压积，调整标本体积，使血液抗凝剂比例为 9:1。红细胞压积需要调整

<30% or >55%.7,12,17

• 在操作过程中的任何时间点，请勿将全血标本或供试品暴露于玻璃容器中。14,16

• 请勿对可见溶血、黄疸或脂血样本进行 UPTT。12

测试程序仪器

部分凝血活酶时间终点可通过手动凝血方法和大多数凝血分析仪检测。分析仪试验方法与用于进行活化部分凝血活酶时间试验 (aPTT) 的方法相同。按照生产商说明进行试验。必须使用实验室建立的 UPTT 参考范围。10

• 所有试验均应重复进行三次。

• 间接接触血液的器械需要 1.0 g 样品。

• 直接接触血液的器械需要 2.5g 的样品。

• 必须精确控制待评价器械与试验血浆接触的时间。

手册

1. 移取 0.1 mL 供试或对照血浆至试验比色皿中，并在 37 ℃ 下孵育血浆 2 min。

2. 在 37 ℃ 下预孵育 0.025 M 氯化钙。

3. 移取 0.1 mL UPTT 试剂，置于含有血浆的试验比色皿中。

4. 将血浆/试剂混合物在 37 ℃ 下孵育 2 至 5 min，或按照方案规定进行孵育。

5. 加入 0.1 mL 预孵育的氯化钙，同时启动计时器。

6. 记录凝血时间

• 所有试验均应重复进行三次

• 间接接触血液的器械需要 1.0 g 样品

• 直接接触血液的器械需要 2.5g 的样品

• 必须精确控制待评价器械与试验血浆接触的时间

质量控制

实验室应遵循普遍接受的质量控制规范。应在检测的每一天运行质控品。

1. 每个供试器械样品必须使用两个水平的阴性对照。

2. 每个供试器械样品必须运行一个阳性对照

如果使用凝血分析仪进行 UPTT，则必须遵循制造商关于正确操作、质量控制和维护的说明。

各实验室应根据确立的实验室程序，通过进行重复研究来确定每批 UPTT 试剂和质控血浆的验收限值。与活化部分凝血活酶时间 (APTT) 结果以与本人所用相同的方式运行比较。

每个实验室必须确定每批 UPTT 试剂和质控血浆的参考范围和验收限值。当 UPTT 试剂批号改变时，需要进行 10 次交叉研究。

准确度、精密度和重现性

正常血浆和质控品水平 1、2 和 3 的 CV 应小于 5%。

UPTT 检测结果的精密度和准确度可能受到许多因素的影响。显著的方案和实验室间差异来自用于测量凝血终点的凝血系统的数量。5,15 可能影响检测结果的实验室内变量包括用于试剂复溶的纯化水的 pH 值、移液技术、孵育时间和温度、试剂污染或试剂批号变化。定期进行的 18,19 次定期质量控制检测将有助于识别可能发生的任何变化并导致错误的检测结果。

结果

UPTT 试验结果应报告为凝血终点（秒）。应一式三份运行供试品和对照品，并在将其与实验室确立的参考范围进行比较之前对结果取平均值。14,16,17,22

结果中应包括 p 值，作为检验有效性的指标。

在统计学上比较未暴露血浆的平均结果与暴露于器械的血浆的结果。为了通过，器械统计必须具有≥0.05 的 p 值。

预期值

正常血浆：> 60 秒水平 1：> 60 秒

水平 2：> 90 秒

水平 3：> 120 秒

注：当在光电分析仪上使用正常质控品血浆进行测试时，UPTT 结果将大于 60 秒。接触激活将缩短该时间。由于分析仪和方案之间的操作差异，每个实验室必须建立 UPTT 的参考范围。实验方案、样品制备和终点检测方法可能会影响试验结果。

局限性

1. 溶血、黄疸或脂血血浆可能产生错误的检测结果。

a. 会影响检测结果的溶血、黄疸或脂血浓度取决于分析仪。17,21

2. 冷冻血浆样本可能导致错误的检测结果。

血液与抗凝剂的比例不正确可能导致虚假的检测结果。对于红细胞压积值高于 53% 的样本，添加到血液中的抗凝剂量必须成比例降低，对于红细胞压积值低于 25% 的样本，添加到血液中的抗凝剂量必须成比例增加。