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日期:2021-09-02浏览:2466次
去除核酸可以改善蛋白质纯化过程中的工作流程,包括实验室样品制备和工业生物处理。HL-SAN 是一种非特异性核酸内切酶,在高盐浓度下具有最佳活性。HL-SAN 在多种缓冲液中均具有活性,并且可以通过还原剂处理轻松灭活。这些特性使 HL-SAN 特别适用于蛋白质的纯化以及从分子生物学试剂中去除 DNA 和 RNA。
核酸,尤其是基因组 DNA,通常会在 DNA 结合蛋白的纯化中造成问题,因为它们会干扰纯化、下游分析或应用。
由于大多数核酸酶受到高浓度盐的抑制,因此很难去除 DNA,因为 NaCl 用于从蛋白质中分离 DNA。
高耐盐性和易去除性使 HL-SAN 有利于在蛋白质纯化方案中使用,特别是与 IMAC(固定化金属亲和层析)介质结合使用,用于在常规层析或高通量中纯化多组氨酸标记的蛋白质设置。
来源 | 在毕赤酵母中重组生产。 |
活动 | HL-SAN 在 10–50°C 的温度范围内高度活跃。活动的最佳 NaCl 浓度为 0.5 M,工作范围为 0.25–1 M。活动需要Mg 2+ (>1 mM)。工作 pH 范围为 7.5-9.5,最佳 pH 值为 9.0。 |
具体活动 | ≥ 175 000 单位/毫克 |
单位定义 | 1 单位定义为在 37°C 下 30 分钟内 1 A 在 260 nm 处的吸光度增加,使用 50 μg/ml 小牛胸腺 DNA(D-1501,Sigma)在由 25 mM Tris-HCl 组成的缓冲液中,pH 8.5 (25°C)、5 mM MgCl 2、500 mM NaCl。 |
咪唑 | 20% 活性在 350 mM 咪唑 |
甘油 | 35% 甘油时 20% 活性 |
海卫 X-100 | Triton X-100 的活性没有降低(测试高达 15%) |
安全数据表 | 不建议 |
尿素 | 不建议 |
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