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德国progen PRAAV2R 说明书

日期:2021-12-31浏览:391次

德国progen PRAAV2R 说明书

AAV2 Titration ELISA 2.0R

主要特点

ELISA 定量 AAV2 衣壳

检测完整和空的 AAV2 衣壳

A20R抗体用作捕获和检测抗体

产品描述

数量96 项测试

反应性AAV2

贮存2-8°C

有可能的使用仅供研究使用

应用酶联免疫吸附试验

产品描述*的微量滴定板酶免疫分析,用于对 AAV2 的病毒粒子和组装的空衣壳进行定量。重组捕获抗体检测未组装衣壳蛋白上不存在的构象表位。

套件控制/标准AAV2的空衣壳制备

提供表格试剂盒,12 x 8 孔条

背景

ELISA原理:

德国progen PRAAV2R 说明书

该测定基于夹心 ELISA 技术,其中对组装的 AAV 衣壳上的构象表位具有特异性的重组抗体被包被到板上,并用于从样本中捕获 AAV 颗粒。


捕获的 AAV 粒子的检测是一个两步过程。


生物素偶联的重组抗体与捕获的 AAV 颗粒结合。

链霉亲和素过氧化物酶偶联物与生物素分子反应。添加底物会导致颜色反应,该反应与特异性结合的病毒颗粒的量成正比。

AAV量化方法的比较:


每种常用的量化方法都有其优缺点:


qPCR被广泛使用,但存在一些问题,例如样品制备、引物设计或 PCR 效率,这些问题会导致实验室间的结果差异很大。

数字液滴 PCR方法克服了 qPCR 的一些局限性。然而,由于不同的样品处理协议,实验室之间的差异仍然可能发生。

如果使用可靠的参考材料,斑点印迹是一种简单且定量的方法。然而,它通常受到蛋白质印迹的有限线性和动态范围的影响。

鉴于上述技术的实际缺点,传统的夹心 ELISA 目前在实验室间和实验室内的变化以及易用性方面似乎更胜一仇。因此,它代表了可靠和可重复量化总 rAVV 衣壳滴度的最佳格式。

德国progen PRAAV2R 说明书

使用 shuffled/mutated AAV:


改组/突变 AAV 载体的识别取决于受改组/突变影响的特定衣壳区域。用于 PROGEN 的 AAV ELISA 的捕获抗体结合特定的,在某些情况下,结合明确的构象表位。这些表位由相应 AAV 血清型的衣壳组装产生。ELISA 可能识别您改组/突变的 AAV 载体的第一个迹象是抗体结合表位的存在。然而,衣壳蛋白的蛋白质序列的变化也可能影响蛋白质的构象,从而影响 AAV 衣壳上表位的构象。这可能会影响抗体的结合亲和力并影响基于 AAV ELISA 试剂盒提供的(非改组)试剂盒对照的滴度确定。由于这些属性在很大程度上取决于执行的特定改组/突变,因此 PROGEN 无法保证对改组/突变的 AAV 载体进行成功和精确的量化。即使抗体结合表位仍然存在于您改组/突变的 AAV 衣壳上,您的检测也需要针对您的特定 AAV 载体进行测试和优化。


PROGEN 强烈建议生产和校准合适的(改组/突变)试剂盒对照,以确保使用 PROGEN ELISA 试剂盒对您单独改组/突变的 AAV 载体进行可靠的滴度测定。


有限使用标签许可:仅供研究使用的

产品由 PROGEN Biotechnik GmbH 拥有。将这些产品用于开发、制造和销售基于购买的产品和/或包括购买的产品的次级产品/衍生物需要基于特许权使用费的分许可协议。

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